Витамин D (25-OH D3) в сухих пятнах крови, 18+, метод ВЭЖХ-МС/МС

Как подготовиться к анализу

Состав набора для получения сухих пятен крови

• Фильтр-бланк для сбора образцов крови. Внимание! Не прикасайтесь пальцами к областям, ограниченным кругами. Эти участки предназначены для нанесения образцов крови.
• Одноразовый ланцет (2 шт.) — автоматическое устройство для прокола кожи.
• Спиртовая салфетка (2 шт.) — для антисептической обработки.
• Стерильная сухая марлевая салфетка — для удаления первой капли крови.
• Бактерицидный пластырь.

Подготовка пациента

Оптимальное время для процедуры взятия крови — с 7:30 до 11:00, натощак.

За сутки до исследования следует придерживаться сложившегося повседневного рациона питания.

При подготовке к взятию крови на фоне медикаментозной терапии прием или отмену лекарственных препаратов следует согласовывать с лечащим врачом.

Для контроля показателей при повторных исследованиях лучше сдавать кровь в одно и то же время суток и соблюдать одинаковые условия подготовки.

За 24 часа до взятия крови рекомендуется исключить:

• физические и эмоциональные перегрузки;
• авиаперелеты; 
• температурные воздействия; 
• нарушение режима сна;
• употребление алкоголя;
• прием БАД;
• инструментальные медицинские обследования (УЗИ, рентген и др.) или процедуры (физиотерапия, массаж и другие).

За 1 час до взятия крови не курить.

Сбор биоматериала

• Тщательно вымойте руки теплой водой и вытрите их бумажным полотенцем.
  Для стимуляции кровотока встряхните руку и разотрите палец. Участки, из которых рекомендуется получать капиллярную кровь - подушечки среднего или безымянного пальцев.
• Обработайте спиртовой салфеткой подушечку и боковые поверхности пальца.
• Возьмите автоматический ланцет (устройство для прокола), скручивающим движением снимите цветной колпачок.
• Плотно прижмите ланцет отверстием к выбранному месту прокола. Нажмите кнопку спуска иглы. Если прокол оказался недостаточно глубоким, и кровь не появилась, не используйте ланцет повторно. Возьмите новый ланцет и повторите прокол.
• Удалите первую каплю крови сухой марлевой салфеткой.
• Мягко массируя палец от основания к месту прокола, добейтесь появления свободно выступающей капли крови. Для лучшего притока крови рекомендуется держать руку и палец опущенными вниз.
• Поднесите фильтр-бланк к капле крови и нанесите кровь строго в центр кружка, не касаясь пальцем поверхности бумаги. Важно: кровь не должна попадать на контур круга или выходить за его пределы.
• Дайте крови самостоятельно впитаться и полностью заполнить кружок. Не размазывайте кровь по поверхности фильтровальной бумаги и не наносите дополнительные капли на уже пропитанный участок.
• Повторите процедуру для всех остальных кружков, используя последующие свободно выступающие капли крови.
• Убедитесь, что кровь равномерно пропитала фильтровальную бумагу и просматривается с обеих сторон фильтр-бланка.
• После окончания сбора крови обработайте палец спиртовой салфеткой и заклейте место прокола пластырем.

Высушивание образца.

Оставьте фильтр-бланк сохнуть на ровной горизонтальной поверхности в течение 4 часов. Не пытайтесь ускорить высыхание с помощью фена, батареи, обогревателя или других бытовых приборов! Во время сушки оберегайте фильтр-бланк от воздействия прямых солнечных лучей.

Хранение и транспортировка.

• После высушивания сложите карточку таким образом, чтобы верхняя створка карточки закрывала область нанесения образцов, защищая фильтр-бланк от соприкосновения с внешними поверхностями.
• Упакуйте фильтр-бланк во вложенный конверт.
• До отправки в лабораторию срок хранения не должен превышать 21 день.
• Не допускайте воздействия прямых солнечных лучей, а также контакта с системами отопления и нагревательными приборами в течение всего срока хранения образца.

Информация для врача

Материал предназначен для врачей.
Информация, размещенная в этом разделе, не может быть использована пациентом для самостоятельной диагностики и лечения.

Витамин D — это жирорастворимое соединение, играющее ключевую роль в поддержании кальциево-фосфорного гомеостаза, регуляции иммунной, эндокринной и репродуктивной функций. 
25 (ОН) D- стабильное соединение, надежный лабораторный маркер для оценки статуса витамина D в организме. 

Биохимия и физиологическая роль
Витамин D представлен двумя основными формами:
D₂ (эргокальциферол) — поступает с пищей растительного происхождения и биодобавками;
D₃ (холекальциферол) — синтезируется в коже под действием ультрафиолетового-излучения и поступает из продуктов питания животного происхождения.
После всасывания в тонком кишечнике с участием желчи и липидов, D₂ и D₃ связываются с транспортным белком (VDBP) и доставляются в печень, где под действием 25-гидроксилазы (CYP3A4) превращаются в 25(OH)D₂ и 25(OH)D₃. Затем в почках (и отчасти в других тканях) фермент CYP27B1 гидроксилирует их до активной формы — 1,25(OH)₂D (кальцитриола), обладающей гормональной активностью. Кальцитриол, взаимодействуя с ядерным рецептором VDR, регулирует транскрипцию генов, отвечающих за транспорт кальция и фосфора в кишечнике и почках, синтез остеокальцина и ремоделирование костной ткани, клеточную пролиферацию, апоптоз и дифференцировку, иммуномодуляцию, включая активацию антимикробных пептидов (кателицидина, β-дефензинов) и подавление провоспалительных цитокинов. Рецепторы VDR экспрессируются в эпителии, эндотелии, иммунных клетках, миокарде и репродуктивных органах, обеспечивая системное действие витамина D.
Кальцитриол усиливает врождённую противомикробную защиту, способствует выработке интерлейкина-10 и других противовоспалительных молекул. Одновременно он снижает синтез IL-2 и IFN-γ, сдерживая чрезмерную активность Th1-иммунного ответа. Также он поддерживает развитие регуляторных Т-клеток и способствует формированию менее агрессивных (толерогенных) дендритных клеток, что помогает снижать риск аутоиммунных реакций.
У женщин витамин D участвует в регуляции рецептивности эндометрия, поддерживает процессы имплантации и плацентогенеза, снижает риск гестационных осложнений (преждевременных родов, преэклампсии, гестационного диабета). У мужчин влияет на экспрессию VDR в сперматогенных клетках и простате, регулирует сперматогенез и уровень тестостерона. Дефицит может снижать фертильность и ухудшать качество спермы.

Причины гиповитаминоза D:

• Недостаточное поступление с пищей из-за ограниченного потребления продуктов, содержащих витамин D (жирной рыбы, печени, яиц, молочных продуктов), соблюдение строгих растительных диет (вегетарианство, веганство).
• Недостаточный синтез в коже под действием солнечного света из-за недостаточного пребывания на солнце, использования солнцезащитных средств, при проживании в северных регионах, сезонном дефиците инсоляции, у пациентов с тёмным цветом кожи (высокое содержание меланина снижает синтез витамина D).
• Нарушение всасывания витамина D в кишечнике из-за хронических заболеваний ЖКТ (целиакии, болезни Крона, синдрома мальабсорбции, муковисцидоза), при состояниях после бариатрических операций, резекции желудка или тонкой кишки.
• Нарушение метаболизма и повышенные потери при заболеваниях печени и почек.
  Повышенная потребность организма в периоды активного роста у детей и подростков; при беременности и лактации, в пожилом возрасте.
• Приём лекарственных препаратов, влияющих на метаболизм витамина D: глюкокортикоидных гормонов, противосудорожных средств, рифампицина, изониазида и других.

В лаборатории CHROMOLAB определение витамина D проводится с применением  высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ–МС/МС). Метод является референсным благодаря высокой чувствительности и селективности, позволяет провести точное количественное определение 25-ОН витамина D и полностью исключает влияние перекрестной реактивности. Подходит для динамического мониторинга при терапии.
Определение 25-ОН витамина D в сухих пятнах крови – альтернативный диагностический метод, точность которого сопоставима с исследованием венозной крови. Процедура отбора капиллярной крови из пальца минимально травматична для пациента, что особенно важно при необходимости многократных исследований. Метод обеспечивает минимизацию ошибок, связанных с центрифугированием, заморозкой и транспортированием жидких образцов крови.

Основные показания к назначению
Суммарное определение форм 25(OH) витамина D рекомендуется:

• при симптомах дефицита витамина D (снижении плотности костной ткани по результатам обследования, боли в костях, мышечной слабости);
• в рамках комплексной диагностики нарушений кальциево-фосфорного обмена и вторичного гиперпаратиреоза;
• перед началом и в процессе терапии остеопороза;
• при заболеваниях органов желудочно-кишечного тракта, протекающих с нарушением образования и выведения желчи, синдромом мальабсорбции;
• при нарушении функции почек;
• на фоне ожирения, метаболического синдрома, сахарного диабета 2 типа;
• при репродуктивных нарушениях, в ходе подготовки к ЭКО, в период беременности;
• при аутоиммунных и воспалительных заболеваниях, иммунодефицитах;
• с целью профилактического обследования у пациентов из групп риска: проживающих в районах с низкой инсоляцией, в пожилом возрасте, в периоды интенсивного роста у детей и подростков;
• мониторинг и коррекция терапии.
  

Дополнительные материалы:

Витамин D: от солнца до клетки

Доступно для скачивания:

Витамин D в практике врача-эндокринолога;

Витамин D в практике врача-кардиолога;

Витамин D в практике врача-акушера-гинеколога;

Витамин D в практике врача-терапевта;

Витамин D в практике врача-гастроэнтеролога;

Витамин D в практике врача-невролога;

Витамин D в практике врача-уролога